哌拉西林（Piperacillin）的EP全套杂质有哪些？

欧洲药典（EP 11.0）收载哌拉西林（Piperacillin）专论，共列出6个指定杂质（Specified impurities），1个其他可检出杂质（Other detectable impurities）。有关物质检测采用梯度洗脱反相高效液相色谱法（HPLC），220nm波长下紫外检测。

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杂质A

• 官方名称：Piperacillin EP Impurity A
• 化学名：(2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-amino-2-phenylacetyl]amino]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid (ampicillin)
• CAS：7177-48-2
• SMILES：[H]C@(C(=O)N[C@]1([H])C(=O)N2[C@]1([H])SC(C)(C)[C@]2([H])C(=O)O)C1=CC=CC=C1
• EP官方CRS：有
• CATO货号：CCAD300067

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杂质B

• 官方名称：Piperacillin EP Impurity B
• 化学名：(4S)-2-[carboxy[[(2R)-2-[[(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-yl)carbonyl]amino]-2-phenylacetyl]amino]methyl]-5,5-dimethylthiazolidine-4-carboxylic acid (penicilloic acids of piperacillin)
• CAS：64817-22-7
• SMILES：[H]C@(C(=O)NC(C(=O)O)C1NC@@(C(=O)O)C(C)(C)S1)C1=CC=CC=C1
• EP官方CRS：无
• CATO货号：C4X-173214

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杂质C

• 官方名称：Piperacillin EP Impurity C
• 化学名：(2RS,4S)-2-[[[(2R)-2-[[(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-yl)carbonyl]amino]-2-phenylacetyl]amino]methyl]-5,5-dimethylthiazolidine-4-carboxylic acid (penilloic acids of piperacillin)
• CAS：2649505-15-5
• SMILES：[H]C@(C(=O)NCC1NC@@(C(=O)O)C(C)(C)S1)C1=CC=CC=C1
• EP官方CRS：无
• CATO货号：C4X-173223

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杂质D

• 官方名称：Piperacillin EP Impurity D
• 化学名：(2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-[[[(2S,5R,6R)-6-[[(2R)-2-[[(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-yl)carbonyl]amino]-2-phenylacetyl]amino]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-yl]carbonyl]amino]-2-phenylacetyl]amino]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid (piperacillinylampicillin)
• CAS：65772-67-0
• SMILES：[H]C@(C(=O)N[C@]1([H])C(=O)N2[C@]1([H])SC(C)(C)[C@]2([H])C(=O)NC@@(C(=O)N[C@]1([H])C(=O)N2[C@]1([H])SC(C)(C)[C@]2([H])C(=O)O)C1=CC=CC=C1)C1=CC=CC=C1
• EP官方CRS：无
• CATO货号：C4X-173217

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杂质E

• 官方名称：Piperacillin EP Impurity E
• 化学名：1-ethylpiperazine-2,3-dione
• CAS：59702-31-7
• SMILES：CCN1CCNC(=O)C1=O
• EP官方CRS：无
• CATO货号：C4X-173259

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杂质F

• 官方名称：Piperacillin EP Impurity F
• 化学名：(4S)-3-acetyl-2-[carboxy[[(2R)-2-[[(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-yl)carbonyl]amino]-2-phenylacetyl]amino]methyl]-5,5-dimethylthiazolidine-4-carboxylic acid (acetylated penicilloic acids of piperacillin)
• CAS：—
• SMILES：[H]C@(C(=O)NC(C(=O)O)C1SC(C)(C)C@(C(=O)O)N1C(C)=O)C1=CC=CC=C1
• EP官方CRS：无
• CATO货号：C4X-17326

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杂质H

• 官方名称：Piperacillin EP Impurity H
• 化学名：(2S,5R,6R)-6-amino-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia- 1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid (6-aminopenicillanic acid)
• CAS：551-16-6
• SMILES：[H][C@]12SC(C)(C)C@(C(=O)O)N1C(=O)[C@@]2([H])N
• EP官方CRS：无
• CATO货号：C4X-11482

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数据来源： 欧洲药典（EP 11.0）Piperacillin专论原文 Disregard limit： 0.05% Total impurities limit： —

哌拉西林合成的核心步骤是N-乙基双氧哌嗪酰氯与氨苄西林的酰化缩合反应，杂质主要产生于这一关键步骤。酰化过程中，未完全反应的氨苄西林原料残留即为EP指定杂质A（ampicillin）；酰氯的水解副产物会生成杂质E（1-ethylpiperazine-2,3-dione）；哌拉西林母核的β-内酰胺环开环水解，会分别生成杂质B（哌拉西林青霉噻唑酸）和杂质C（哌拉西林青霉烯酸）；两分子哌拉西林发生缩合副反应则生成二聚体杂质D。因此，酰化缩合反应的转化率控制、后续重结晶精制步骤是控制上述指定杂质的关键工艺控制点（推断）。

从NMPA审评视角来看，哌拉西林作为半合成青霉素类原料药，注册申报中重点核查项目包括β-内酰胺环开环降解杂质和工艺残留杂质的控制。β-内酰胺开环产物不仅影响产品含量，还可能与聚合物杂质一同增加过敏反应风险，NMPA要求对半合成青霉素类杂质必须严格控制在规定限度内，且需提供足够的杂质结构确证和方法学验证资料。EMA要求与NMPA基本一致，均遵循ICH Q3A对原料药杂质的控制要求，对于单个超过鉴定限的杂质必须完成结构确证。结合EP专论要求，建议企业在方法开发阶段重点验证杂质A与主峰的分离度，EP明确要求二者分离度不低于10，这是方法学验证的核心合格指标；工艺开发中需重点控制氨苄西林残留和酰化副反应，从源头减少杂质A和二聚体杂质D的生成（推断）。

对于有EP官方CRS的杂质（仅杂质A氨苄西林），可直接通过EDQM获取官方对照品，是注册申报方法学验证的首选。其余EP指定杂质均未提供官方CRS，需要企业自行解决对照品来源，对照品的纯度和溯源性直接影响方法学验证的合规性。对于其他可检出杂质H，EP不要求强制鉴定，但若实际生产中检出超过鉴定限，需按照ICH Q3A要求进行结构确证和安全性评估。如需获取Piperacillin EP杂质对照品（包括EP未提供官方CRS的杂质），欢迎联系CATO Research Chemicals（佳途科技）获取支持。

CATO Research Chemicals（佳途科技）提供Piperacillin EP全套杂质对照品，所有产品均符合ISO 17034标准，持有CNAS与ANAB双认证，每批次产品附带完整COA（分析报告）和可溯源证书，完全支持EMA、NMPA以及ICH框架下的注册申报需求，可为哌拉西林原料药的质量控制和合规申报提供可靠保障。